PCR φθορισμού εξαρτήσεων ανίχνευσης νουκλεϊνικού οξέος CE ιών Monkeypox μέθοδος

Εξάρτηση ανίχνευσης νουκλεϊνικού οξέος ιών Monkeypox (PCR φθορισμού μέθοδος)

[ΠΡΟΔΙΑΓΡΑΦΗ]

24tests/kit, 48tests/kit, 96tests/kit

[ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ]

Αυτή η εξάρτηση χρησιμοποιείται για να επιτύχει την ποιοτική ανίχνευση του προερχόμενου από ιό DNA Monkeypox που εξάγεται από τα δείγματα εκκριμάτων ολόκληρου αίματος, ορών ή τραυμάτων των πιθανών μολυσμένων ασθενών και άλλων ασθενών που απαιτούν τη διάγνωση.

[ΑΡΧΗ]

Αυτή η εξάρτηση χρησιμοποιεί τη σε πραγματικό χρόνο φθορισμού PCR τεχνολογία για να επιλέξει μια σχετικά συντηρημένη περιοχή του τεμαχίου νουκλεϊνικού οξέος ιών Monkeypox ως περιοχή στόχων ενίσχυσης, συγκεκριμένους εγχυτήρες σχεδίου και διαφορετικές φθορισμού ετικέτες ελέγχων, και τεχνολογία rt-pcr χρήσης για να ανιχνεύσει εάν το δείγμα περιέχει το προερχόμενο από ιό DNA Monkeypox.

[ΣΥΣΤΑΤΙΚΟ]

Σημείωση:

Μην αναμίξτε τα συστατικά από τις διαφορετικές batch για την ανίχνευση.

Αντιδραστήρια εξαγωγής νουκλεϊνικού οξέος: Συστήστε το αντιδραστήριο εξαγωγής νουκλεϊνικού οξέος που κατασκευάζεται από Dewei.

Καμία εξαγωγή νουκλεϊνικού οξέος ανάγκης κατά το χρησιμοποίηση του θετικού το ελέγχου, εξαγωγή νουκλεϊνικού οξέος δεν απαιτείται κατά χρησιμοποίηση του αρνητικού ελέγχου.

[ΑΠΟΘΗΚΕΥΣΗ ΚΑΙ ΣΤΑΘΕΡΟΤΗΤΑ]

Η εξάρτηση μπορεί να αποθηκευτεί σε -20±5 ℃ για 12 μήνες.

Προσωρινά κατάστημα σε 4 ℃ για την ημέρα 7.

Το επαναλαμβανόμενο πάγωμα και το ξεπαγώνω δεν πρέπει να υπερβούν 7 φορές, το αντιδραστήριο ανοίγματος δεν πρέπει να υπερβεί 7 φορές.

Ο ξηρός πάγος για να κρατήσει τη μεταφορά χαμηλής θερμοκρασίας δεν πρέπει να υπερβεί 4 ημέρες.

[ΟΡΓΑΝΑ]

Σε πραγματικό χρόνο PCR όργανο όπως ABI7500, ABI7300, LightCycler480, το βιο-RAD CFX96, slan-96S και QuantStudio.

[ΔΕΙΓΜΑΤΟΛΗΨΙΑ ΚΑΙ ΧΕΙΡΙΣΜΟΣ]

• Κατάλληλος τύπος δειγμάτων: δείγματα εκκριμάτων ορών και τραυμάτων.
  2. Συλλογή: Το δείγμα πρέπει να συλλεχθεί στους αποστειρωμένους σωλήνες σύμφωνα με τα πρότυπα
  τεχνικές προδιαγραφές.
  Αποθήκευση: Το συλλεχθε'ν δείγμα πρέπει να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση αμέσως ή να παγώσει
  ≤-20°C για όχι περισσότερους από έναν μήνα. Το επαναλαμβανόμενο πάγωμα και το ξεπαγώνω πρέπει να είναι αποφεύγουν.
  3. Μεταφορά: Το δείγμα πρέπει να μεταφερθεί χρησιμοποιώντας το σφραγισμένο κιβώτιο αφρού με τον πάγο.

[ΠΡΩΤΟΚΟΛΛΟ]

• Επεξεργασία δειγμάτων και εξαγωγή νουκλεϊνικού οξέος (περιοχή επεξεργασίας δειγμάτων)

Συστήνεται να ληφθούν τα υγρά δείγματα 200μL, ο θετικός έλεγχος και ο αρνητικός έλεγχος για την εξαγωγή νουκλεϊνικού οξέος, σύμφωνα με τις αντίστοιχες απαιτήσεις και τις διαδικασίες των προερχόμενων από ιό εξαρτήσεων εξαγωγής DNA.

• PCR προετοιμασία αντιδραστηρίων (περιοχή προετοιμασιών αντιδραστηρίων)

Βάλτε τους PCR σωλήνες στη δεξαμενή και το σύνολο αντίδρασης ονομάζει κάθε αντίδρασης καλά στην αντίστοιχη διαταγή.

Πάρτε έξω PCR MVP το αντιδραστήριο Α και Β από την εξάρτηση, ξεπαγώστε στη θερμοκρασία δωματίου, τινάξτε και αναμίξτε, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε 8.000 περιστροφές/λεπτό για λίγα δευτερόλεπτα πριν τη χρήση.

Πάρτε τα PC Ν PCR των σωλήνων αντίδρασης (Ν = αριθμός δειγμάτων που εξετάζονται + αρνητικός έλεγχος + θετικός έλεγχος)

Η διαμόρφωση του ενιαίου συστήματος ενίσχυσης MVP είναι η ακόλουθη:

Μετά από να αναμίξει τα συστατικά λεπτομερώς, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση για μια σύντομη περίοδο έτσι ώστε όλο το υγρό στον τοίχο σωλήνων υποβάλλεται στο κατώτατο σημείο του σωλήνα, και έπειτα διανέμοντα 20 µl του συστήματος ενίσχυσης PCR στους σωλήνες.

• Δειγματοληψία (περιοχή προετοιμασιών δειγμάτων)

Προσθέστε 5µl κάθε του επεξεργασμένου αρνητικού ελέγχου, το νουκλεϊνικό οξύ του δείγματος που εξετάζεται, και το θετικό έλεγχο MVP στους ανωτέρω PCR σωλήνες, σφιχτά τα καλύμματα σωλήνων και να υποβάλει σε φυγοκέντρωση σε 8.000 περιστροφές/λεπτό για λίγα δευτερόλεπτα, κατόπιν μεταφορά στην περιοχή ανίχνευσης ενίσχυσης.

• PCR ενίσχυση (περιοχή ενίσχυσης)

Βάλτε τους PCR σωλήνες στη δεξαμενή και το σύνολο αντίδρασης ονομάζει κάθε αντίδρασης καλά στην αντίστοιχη διαταγή.

Τοποθετήσεις του φθορισμού ανίχνευσης: (1) ιός Monkeypox (FAM) (2) εσωτερικός έλεγχος (CY5).

Τρέξτε το ακόλουθο πρωτόκολλο ανακύκλωσης: ABI7500, τα βιο-RAD CFX96, slan-96S και QuantStudio, παρακαλώ αναφέρονται στο εγχειρίδιο χρηστών οργάνων για την καλύτερη λειτουργία:

• Ανάλυση αποτελεσμάτων (παρακαλώ αναφερθείτε στο εγχειρίδιο χρηστών οργάνων)

Μετά από την αντίδραση, τα αποτελέσματα θα σωθούν αυτόματα. Χτυπήστε «Analyze» που αναλύει, και το όργανο θα ερμηνεύσει αυτόματα τις τιμές CT κάθε δείγματος στη στήλη αποτελέσματος. Τα αρνητικά και θετικά αποτελέσματα ελέγχου θα προσαρμοστούν στον ακόλουθο

«5. Ποιοτικός έλεγχος».

• Ποιοτικός έλεγχος

Αρνητικός έλεγχος: Κανένα CT ή Ct>40 στο κανάλι FAM, Ct≤40 στο κανάλι CY5 με την κανονική καμπύλη ενίσχυσης.

Θετικός έλεγχος: Ct≤35 σε FAM το κανάλι με την κανονική ενίσχυση κάμπτει, Ct≤40 στο κανάλι CY5 με την κανονική καμπύλη ενίσχυσης.

Το αποτέλεσμα ισχύει εάν όλα τα ανωτέρω κριτήρια ικανοποιούνται. Διαφορετικά, το αποτέλεσμα είναι άκυρο.

[ΕΡΜΗΝΕΙΑ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ]

Τα ακόλουθα αποτελέσματα είναι δυνατά:

ΣΗΜΕΙΩΣΗ: Εάν το άκυρο αποτέλεσμα εμφανίζεται, το δείγμα πρέπει να συλλεχθεί και να εξεταστεί πάλι.

[ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΑΝΙΧΝΕΥΣΗΣ]

Το αποτέλεσμα ανίχνευσης αυτής της εξάρτησης είναι μόνο για την κλινική αναφορά, και δεν πρέπει να χρησιμοποιηθεί άμεσα ως στοιχεία για την κλινικές διάγνωση και τη θεραπεία. Η κλινική διαχείριση των ασθενών πρέπει να εξεταστεί σε σχέση με με τα συμπτώματα, το ιατρικό ιστορικό και την ιστορία έκθεσής τους.

Το αποτέλεσμα ανίχνευσης μπορεί να επηρεαστεί από τις διαδικασίες, συμπεριλαμβανομένης της συλλογής δειγμάτων, της αποθήκευσης και της μεταφοράς. Το ψεύτικο αρνητικό αποτέλεσμα μπορεί να εμφανιστεί εάν υπάρχουν οποιαδήποτε λάθη στη λειτουργία. Η διαγώνια μόλυνση κατά τη διάρκεια της επεξεργασίας δειγμάτων μπορεί να οδηγήσει στο ψευδοθετικό αποτέλεσμα.

[ΠΡΟΔΙΑΓΡΑΦΕΣ ΑΠΟΔΟΣΗΣ]

Περιορισμός ανίχνευσης: 500 αντίγραφα το /mL.

Ακρίβεια: Ο συντελεστής της παραλλαγής (βιογραφικό σημείωμα, %) της αξίας CT της μέσα-batch/μεταξύ-batchprecision είναι ≤5%.

Ακρίβεια: Το ποσοστό συμμόρφωσης αρνητικής/θετικής αναφοράς: 100%.

Ιδιομορφία: κανένα cross-reactivity με το ανθρώπινο γονιδίωμα και τα ακόλουθα παθογόνα: ιός ευλογιάς, ιός φλυκταινώδους νόσου προβάτων, ιός ιός δαμαλίτιδας, ιός φλυκταινώδους νόσου κοτόπουλου, ιός ηπατίτιδας Β, ιός ηπατίτιδας Γ, ανθρώπινης ανεπάρκειας αντισωμάτων, enterovirus.

[ΠΡΟΣΟΧΕΣ]

• Αυτό το προϊόν χρησιμοποιείται μόνο για τη τεχνητή δοκιμή. Παρακαλώ διαβάστε αυτό το εγχειρίδιο προσεκτικά πριν τη χρήση.
• Αποστειρωμένοι, DNase-ελεύθεροι και RNase-ελεύθεροι σωλήνες και άκρες χρήσης κατά τη διάρκεια της ανίχνευσης.
• Κατά τη διάρκεια της ανίχνευσης, είναι απαραίτητο να αποφευχθεί η παράλληλη μόλυνση, οι κατάλληλοι προστατευτικοί εξοπλισμοί ένδυσης, τα μίας χρήσης γάντια και οι μάσκες, και να ολοκληρωθεί η λειτουργία στο biosafety γραφείο για να αποφύγει τις επιβλαβείς ουσίες την αναπνευστική οδό.
• Σε περίπτωση επαφής με το δέρμα και βλεννώδους μεμβράνης κατά τη διάρκεια της χρήσης, παρακαλώ ξεπλύντε αμέσως με το ρέοντας νερό, το οποίο δεν θα προκαλέσει οποιαδήποτε ζημιά στο χειριστή.

Όλα τα υγρά αντιδραστήρια πρέπει να λειώσουν πλήρως και να αναμιχθούν στη θερμοκρασία δωματίου πριν τη χρήση, και να υποβληθούν σε φυγοκέντρωση σε 8.000 περιστροφές/λεπτό για λίγα δευτερόλεπτα πριν τη χρήση.

Η μεταγενέστερη χρήση, η συσκευασία και το υγρό αποβλήτων πρέπει να επεξεργαστούν ομοιόμορφα ως ιατρικά απόβλητα για να αποτρέψουν τη ρύπανση.